诺禾致源

胰腺发育不全常被界定为胰腺 β-cell 障碍和胰腺外分泌功能不足。

据报道，多数胰腺发育不全综合征患者由GATA6 杂合性突变引起；

而目前多数单独的、非综合征型的胰腺发育不全病的致病原因，除了两个家系中报道发现PDX1 编码区

发生隐性突变（Stoffers DA, et al., 1997点击阅读；

Schwitzgebel VM, et al., 2003点击阅读），还有很多尚不明确。

研究简介

英国埃克塞特大学医学院的研究人员通过采用芯片连锁和全基因组测序分析，

找到了导致单纯性的胰腺发育不全的隐性突变 chr10: 23508437A>G，研究成果发表于2014年6月的

Nature Genetics（29.352）。

研究方法

选取2例近亲结婚先天性胰腺发育不全患者，

采用全基因组测序（Whole genome sequencing）技术，测序深度分别为73 X、63 X；

通过数据质控、比对参考基因组、变异检测、突变位点过滤等方法，

结合表观基因组学分析结果，筛选致病基因。

研究结果

1. 锁定包含PTF1A 在内的10号染色体

首先对3个无血缘关系近亲结婚家系中6个患病个体和1个正常个体进行纯合子定位，锁定包含PTF1A 在内的10号染色体（图1）。

2. 全基因组测序寻找非编码区与疾病相关纯合变异

随后对无血缘关系具有多个患病个体家系中2例 probands 进行全基因组测序，通过81个control whole genomes/1000G（MAF>1%）过滤，结合胰腺祖细胞的表观遗传学结果，进一步对调控区域变异位点进行选择，寻找非编码区与疾病相关纯合变异。研究发现10个先天性胰腺发育不全患者中6例病人PTF1A 下游~25 kb，chr10: 23508437A>G，变异位于增强子 400 bp 大小进化保守性区域（图2）。

图1　芯片连锁发现10号染色体与疾病相关

图2　全基因组测序发现PTF1A 突变

3. PTF1A 突变破坏转录增强子的功能

研究人员进一步开展了家系内验证、正常人群验证和细胞功能性验证；结果表明，所发现的胰腺发育不全患者突变区域是胰腺祖细胞转录因子FOXA2、PDX1 等的结合区域，突变会破坏增强子的活性，并使得胰腺发育受阻（图3）。

图3　胰腺发育不全突变破坏转录增强子活性

结论与讨论

经患病人群和细胞试验验证，

PTF1A 末端增强子隐性突变引起了单纯性胰腺发育不全。

研究表明发育相关增强子中新的隐性遗传顺式调节突变可成为罕见孟德尔疾病的致病原因；

而在单基因病研究中，通过整合表观基因组学等功能性注释与基因组测序结果

可以发现新的基因调节元件的突变。